Lyposmol Biotech

Lyposmol Biotech es una compañía biotecnológica que, desde su origen en 2013, ha apostado por el desarrollo de productos altamente innovadores capaces de aportar soluciones reales a una disciplina médica emergente como es la Medicina Regenerativa.

Lyposmol se encuentra en constante investigación sobre sus productos, y en continua mejora de los mismos. Con una trayectoria de más de 2000 kits lanzados al mercado, Lyposmol colabora con Hospitales pioneros en España, y junto con médicos referentes en el sector.

  1. Apuesta por productos altamente tecnológicos
  2. Resolver las necesidades del mercado de la medicina regenerativa
  3. Acuerdos de colaboración con centros de investigación
  4. Máximo rigor científico, seguridad y legalidad
  5. Productos testeados en un mercado en constante evolución
  6. Soporte
  7. La confianza de nuestros clientes

PRODUCTOS Y SERVICIOS

Lyposmol Biotech no solo proporciona un producto, ofrece una gama de servicios para dar solución a las necesidades clínicas actuales.

    • T.E.K. Adipose
    • ADSC System

Lyposmol ADSC System® es un producto en bajo la forma de “Coverpack®” (pack estéril) desarrollado, investigado y optimizado para obtener los grupos celulares de la Fracción Vascular Estromal (FVS) del tejido adiposo con la mayor viabilidad, bioseguridad, efectividad y rentabilidad del mercado, cumpliendo con los requisitos legales para su comercialización.

El producto Lyposmol ADSC System® ha sido desarrollado de acuerdo con la legislación española y europea, y el departamento técnico de Lyposmol está en constante comunicación con los organismos oficiales acreditados para ofrecer las máximas garantías para los mercados de terapia regenerativa y terapia inmediata.

Nuestros productos:

ADSC Enzyme

Reactivo enzimático

Control por Farmacopea Europea

En 2021 será dispositivo médico de tipo III por el nuevo reglamento

Coverpack

Fabricado por Cardiva
CE 0120

Producto sanitario bajo la DIRECTIVA 93/42/EEC del 14 Junio 1993

Contiene todos los instrumentos necesarios estériles para la obtención del SVF

ADSC ENZYME®: REACTIVO ENZIMÁTICO

ADSC Enzyme® se utiliza para digerir el tejido conectivo de la grasa, y para el aislamiento óptimo con la mayor viabilidad celular posible y los más altos estándares de calidad, efectividad y seguridad en el proceso.

Este método de obtención del SVF es el método de referencia para obtener el rendimiento adecuado para el tratamiento de enfermedades degenerativas.

La enzima Colagenasa debe definirse como un producto para uso en aspectos clínicos o médicos y, dependiendo de su aplicación, tendría diferentes regulaciones.

– Medicamento: cuando se usa en el hospital para algunas enfermedades claras con indicaciones aprobadas.

– Reactivo: Para el aislamiento de grupos celulares (Que es el uso en este caso) Se define con el término Reactivo dentro de la Farmacopea Europea

«a todas las sustancias que interactúan con otros en una reacción química y que dan lugar a otras sustancias de propiedades, características y diferentes conformaciones, llamadas productos de reacción o simplemente productos. Los reactivos se utilizan para investigación científica, química y se utilizan en diferentes laboratorios de producción «

Se adjunta información adicional en el Anexo II sobre el ADSC Enzyme®.

EFICACIA Y CARACTERIZACIÓN

La calidad del producto obtenido define la calidad del procesado. En cuanto a seguridad se llevan a cabo análisis microbiológicos, de endotoxinas y de actividad enzimática residual para garantizar que el producto implantado será seguro para el paciente. Respecto a la eficacia del proceso de obtención del SVF del tejido adiposo, se determina contabilizando las células que se obtienen, y muy en concreto las células madre mesenquimales.

Aunque la cantidad celular varía enormemente entre un individuo y otro, llevando a cabo un análisis adecuado de varias muestras de SVF podemos saber si la dosis que obtenemos de células es una dosis eficaz.

Los métodos de obtención de SVF mecánicos no podrán medir con fiabilidad el numero de células de su producto final, ya que los adipocitos interfieren en el análisis no permitiendo que éste sea adecuado. Para realizar un contaje celular, tendrán que digerir el producto previamente, lo que no nos da información real del producto implantado en fresco.

Para llevar a cabo un contaje celular adecuado, se utiliza la técnica de citometría de flujo. Esta técnica permite medir simultáneamente múltiples características físicas y químicas de células o partículas en suspensión que atraviesan un haz de luz (laser), y ofrece la posibilidad de separar las células (sorting) en función de sus características.

Para caracterizar a las células madre mesenquimales o MSCs actualmente se utiliza una batería de anticuerpos monoclonales y diferentes tipos de tinciones. Por ello, consideramos que el 95% o más de la población de MSCs debe expresar CD105, CD73, CD90 , CD13 y CD44 medidos mediante citometría de flujo. Adicionalmente, estas células no deben expresar antígenos de células hematopoyéticas (igual o menor del 2%) como: CD31, CD34, CD36, CD45, CD106, CD235 Y HLA DR.

Con el fin de uniformar una definición de las MSCs, Gimbleet al. han sugerido que las células troncales empleadas en medicina regenerativa deberían reunir los siguientes criterio:

  • 1. Puedan encontrase en grandes cantidades (del orden de millones-billones de células).
  • 2. Puedan obtenerse por procedimientos mínimamente invasivos.
  • 3. Puedan diferenciarse en múltiples líneas celulares de manera regulable y reproducible.
  • 4. Puedan ser trasplantadas a un hospedador autólogo o alogénico en condiciones de seguridad y efectivida
  • 5. Puedan ser obtenidas de acuerdo con las Guías de GMPs

Con esta técnica, Lyposmol ha llevado a cabo una contabilidad celular de muestras de SVF con el Kit ADSC System de Lyposmol.

 

CONTABILIDAD CELULAR BASICA Grasa extraída en cc60cc
PLA35cc
Células nucleadas totales en SVF47.137.615
Células con capacidad regenerativa26.755.310
ASCs15.743.963
Viabilidad99’38%

Resultados del análisis

Los datos obtenidos nos permiten garantizar que el implante de SVF que será implantado tras el procesado del tejido adiposo del paciente con el Kit ADSC System de Lyposmol, obtendrá el número de células madre mesenquimales suficientes para garantizar la eficacia del tratamiento.

El contaje celular obtenido no solo es ligeramente elevado al de la media obtenida por otros medios mecánicos, sino que la viabilidad es muy superior. Para ampliar información acerca de caracterización celular, consultar Anexo III.

SEGURIDAD

El kit ADSC System, cuenta con tres puntos de bioseguridad:

Punto 1. Dosis de Colagenasa.  (Anexo I Calidad de la enzima Colagenasa)

El envase de colagenasa contiene la dosis justa para obtener la digestión del tejido conjuntivo contenido en 60 cc de grasa, si no se obtiene dicha calidad, el fabricante facilita unas tablas de conversión para garantizar que la cantidad de enzima utilizada es la suficiente para garantizar el procesado, y que en ningún momento supera la dosis de seguridad.

CONTROL 1

Actividad Enzimática VS Volumen grasa en 60cc de tejido adiposo

Punto 2. PPP: Neutralización del enzima

La actividad enzimática es totalmente neutralizada por el plasma pobre en plaquetas que se obtiene con el Kit ADSC System de Lyposmol. De esa manera, se garantiza la completa neutralización con la proteína del propio individuo de una forma natural, con una simple extracción de sangre.

CONTROL 2

Actividad Enzimática VS Volumen suero

CONTROL 3

Medición actividad enzimática residual

EKC® (Enzymatic Kit Control®) es un producto desarrollado en exclusiva y patentado por Lyposmol Biotech que permite la comprobación de ausencia de actividad enzimática por un método colorimétrico sencillo en cada proceso Lyposmol ADSC y antes del implante SVF.

De este modo, Lyposmol se posiciona como el sistema con la máxima bioseguridad del mercado.

Punto 3. EKC: Medición actividad residual

FUENTES DE OBTENCIÓN DE CÉLULAS MADRE

Las fuentes de obtención de células madre mesenquimales adultas (MSC) son:

  • ADSC – Tejido adiposo
  • BMSC – Médula Ósea
  • HSC – Sangre
  • ESC – Piel
  • DPSC – Pulpa dental

Los tejidos frecuentemente más utilizados son el tejido adiposo y el tejido de médula ósea. A continuación, se detalla en una tabla las diferencias entre estas dos fuentes de obtención de MSC:

La bibliografía estudiada avala que la obtención de ADSC de tejido adiposo es un  procedimiento  fácil  y  mínimamente invasivo. (1)

Tabla 1: Datos recogidos por Lyposmol Biotech

El rendimiento celular se mide en función de número de células nucleadas obtenidas. Esto, en el tejido adiposo se mantiene constante, pero en médula ósea, se ha estudiado que la concentración celular varía con la edad y los hábitos no saludables.

Aunque las células madre mesenquimales de ambas procedencias presentan propiedades funcionales similares, (2) el potencial condrogénico, frente al osteogénico, de las células derivadas de tejido adiposo es mayor que el potencial condrogénico de las células madre de médula ósea. (3) (4)

Según una publicación de la revista International Orthopaedics 5donde habla del número de células en médula ósea de cresta iliaca para el tratamiento de la osteonecrosis de cadera, se establecen los siguientes datos:

  • El volumen máximo de médula ósea presente en un cresta ilíaca es de alrededor de 150 cc.
  • La concentración de MSC en aspirado medular depende de la técnica aspiración debido al riesgo de dilución de sangre.
  • El mayor número de MSC obtenidas por aspiración de médula ósea es de alrededor de 4000 MSCs por cc (más frecuentemente, es alrededor de 1000 MSCs por cc)

Ilustración 1: Daniels EJ, Scientific Data Series in Regenerative Cell Therapy 2004, MacroPore Biosurgery

La cantidad de MSC obtenida de médula ósea es mucho menor que en tejido adiposo (Ilustración 1). Esta diferencia se debe, en parte, a la variabilidad entre distintos procesos de extracción y a la hemodilución del aspirado medular.

Se han utilizado otros métodos para obtener la mínima dosis eficaz, como la repetición del aspirado e implante separados en un intervalo de tiempo, o el aspirado de las dos crestas iliacas para el tratamiento de una sola articulación. La cantidad obtenida hace que en la mayoría de los estudios se necesiten células madre expandidas para obtener resultados que garanticen la eficacia del tratamiento, lo que supone una manipulación sustancial que convierte el proceso en una terapia avanzada. (5)

La viabilidad celular también es inferior en el aspirado de médula ósea debido al procedimiento de extracción del mismo. (6)

La dificultad del proceso de extracción es más compleja e invasiva para el paciente (existen riesgos superiores de infección), siendo estos motivos suficientes para afirmar que la mejor fuente de obtención de células madre mesenquimales adultas es el tejido adiposo.

 

(1)  De Ugarte DA, Morizono K, Elbarbary A, Alfonso Z, Zuk PA, Zhu M, 415 et al. Comparison of multi- lineage   cells   from   human   adipose   tissue   and   bone   marrow.   Cells,   tissues,   organs. 2003;174(3):101-9.

(2)  Human   Dedifferentiated   Adipocytes   Show   Similar   Properties   to   Bone   Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells A. Poloni et al. Stem Cell 2012

(3)  History of concentrated or expanded mesenchymal stem cells for hip osteonecrosis: is there a target number for osteonecrosis repair? Philippe Hernigou et al. International Orthopaedics 2018

(4)  The Basic Mechanism of Hair Growth Stimulation by Adipose-derived Stem Cells and Their Secretory Factors Chong Hyun Won et al. Bentham Science Publishers 2017

(5)  Strioga M, Viswanathan S, Darinskas A, Slaby O, Michalek J. Same or not the same? Comparison of adipose tissue-derived versus bone marrow-derived mesenchymal stem and stromal cells, Stem Cells and Development. Stem Cells Dev. 2012 20;21(14):2724-52

(6)  Jang Y1, Koh YG, Choi YJ, Kim SH, Yoon DS, Lee M, et al. Characterization of adipose tissue-derived stromal vascular fraction for clinical application to cartilage regeneration, In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2015. 51(2):142-50

INFORME SOBRE DIFERENCIAS ENTRE MÉTODOS DE OBTENCIÓN DE ADSC

MÉTODOS MECÁNICOS VS ENZIMÁTICOS

Distinto número de células y distinta viabilidad

El número de células nucleadas obtenido con métodos de obtención de SVF mecánicos es sustancialmente menor que el número de células obtenido por procesos de obtención enzimáticos.

 

Imposibilidad de caracterización del método mecánico

Los métodos de obtención de SVF mecánicos no podrán medir con fiabilidad el número de células de su producto final, ya que los adipocitos interfieren en el análisis no permitiendo que éste sea adecuado. Para realizar un contaje celular, tendrán que digerir el producto previamente, lo que no nos da información real del producto implantado en fresco.

Métodos enzimáticos son los métodos de referencia

Un estudio establece en sus conclusiones que el método que utiliza colagenasa es el gold estandard para separarlas de la grasa.

«The results of intraoperative isolation procedures are comparable with those of the gold standard, the collagenase based non-intraoperative isolation protocol.» (1)

Hay un estudio comparativo que habla de tres diferentes productos para obtener el SVF, estos tres métodos son enzimáticos. Acerca del procedimiento de obtención general hablan de un método de referencia para todos ellos, que coincide con el método usado por Lyposmol, y que no incluye en ningún caso la separación únicamente por procedimientos mecánicos

El tejido se para eliminar fluidos de lipoaspirado y luego se digiere siempre con colagenasa durante agitación constante y se separa por centrifugación. (2)

Adipocitos rotos producen inflamación y degradación de cartílago

Los métodos de procesado mecánicos, uenen una desventaja clara, y es que al obtener el SVF se rompen adipocitos los cuales liberan su contenido. Las sustancias que albergan los adipocitos, en gran medida son sustancias proinflamatorias y radicales libres. En un estudio del protocolo de procesamiento del tejido adiposo, indica que la capa de adipocitos rotos se elimina. (3) Habría que estudiar la permanencia de las sustancias liberadas por estos adipocitos en la fracción estromal vascular.

El principal componente celular del tejido adiposo son los adipocitos, las células grandes que acumulan triglicéridos en forma de goutas lipídicas. En parucular, en condiciones de obesidad, los adipocitos se encuentran en un medio con falta de oxígeno, lo que los lleva a la hipoxia, el aumento del estrés oxidauvo, el reclutamiento de leucocitos inflamatorios y eventualmente la fibrosis.

Conclusiones:

Bibliografía

  • 1. Comparison of intraoperative procedures for isolation of clinical grade stromal vascular fraction for regenerative purposes: A systematic review
  • 2. Evaluation of Three Devices for the Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Adipose Tissue and for ASC Culture: A Comparative Study
  • 3. Protocol of extraction and processing of adult stem cells from abdominal adipose tissue: coordenates of the plastic surgeon in translational researching. Serna-Cuéllar E., Santamaría- Solís L. Cir.plást. iberolatinoam 201-Vol. 39-Supl. Pag. S44-S50
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